Hoechst 33258染色液
簡要描述:貨 號:C0400名 稱:Hoechst 33258染色液規(guī) 格:50ml價 格:298.00CAS:23491-45-4
產(chǎn)品型號:
所屬分類:染色液
更新時間:2024-01-07
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式為C25H24N6O·3HCl,分子量為533.88,CAS Number 23491-45-4。
Hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低。
Hoechst 33258染色常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。
Hoechst 33258的zui大激發(fā)波長為346nm,zui大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,zui大激發(fā)波長為352nm,zui大發(fā)射波長為461nm。
試劑盒組成 | 規(guī)格 | 保存條件 |
Hoechst 33258濃縮液(50X) | 1ml | -20℃避光 |
Hoechst 33258稀釋液 | 50ml | 2-8℃ |
此染色液做成濃縮液和稀釋液主要是為了使用方便,因為濃縮液才1ml,解凍起來很快,實際也可以一次將濃縮液都加入稀釋液中,混勻使用。但如果一次使用量比較少,使用次數(shù)比較多,是適當(dāng)分裝一下,免得多次凍融。
使用說明:
Hoechst 33258染色液染色液的配制:將Hoechst 33258濃縮液取出解凍,輕輕混勻,短時間離心,根據(jù)使用量,按照1ml33258稀釋液加入20ul33258濃縮液的比例配制,即成Hoechst 33258染色液。此配好的染色液深度為10ug/ml,如果感覺染色顏色比較深,可適當(dāng)?shù)南♂專ㄓ孟♂屢海?。此配好的染色液未用完可存放?20℃避光。
1. 對于固定的細(xì)胞或組織:
a. 對于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則先進(jìn)行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b. 對于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對于活細(xì)胞或組織:
a. 加入適當(dāng)量,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測。