Hoechst 33342染色液
簡(jiǎn)要描述:貨 號(hào):C0420名 稱(chēng):Hoechst 33342染色液規(guī) 格:50ml價(jià) 格:298.00CAS:23491-52-3
產(chǎn)品型號(hào):
所屬分類(lèi):染色液
更新時(shí)間:2024-01-07
廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
Hoechst 33342,也稱(chēng)bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式為C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量為615.99,CAS Number 23491-52-3。
Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。
Hoechst 33342染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33342也常用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。
Hoechst 33342的zui大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后,zui大激發(fā)波長(zhǎng)為350nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。
本Hoechst 33342染色液可用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
試劑盒組成 | 規(guī)格 | 保存條件 |
Hoechst 33342濃縮液(50X) | 1ml | -20℃避光 |
Hoechst 33342稀釋液 | 50ml | 2-8℃ |
此染色液做成濃縮液和稀釋液主要是為了使用方便,因?yàn)闈饪s液才1ml,解凍起來(lái)很快,實(shí)際也可以一次將濃縮液都加入稀釋液中,混勻使用。但如果一次使用量比較少,使用次數(shù)比較多,是適當(dāng)分裝一下,免得多次凍融。
使用說(shuō)明:
Hoechst 33342染色液染色液的配制:將Hoechst 33342濃縮液取出解凍,輕輕混勻,短時(shí)間離心,根據(jù)使用量,按照1ml33342稀釋液加入20ul33342濃縮液的比例配制,即成Hoechst 33342染色液。此配好的染色液深度為10ug/ml,如果感覺(jué)染色顏色比較深,可適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)ㄓ孟♂屢海?。此配好的染色液未用完可存放?/span>-20℃避光。
1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織:
a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則先進(jìn)行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33342染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33342染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量Hoechst 33342染色液,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織:
a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33342染色液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液,對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。
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