B27無血清培養(yǎng)基不含有蛋白質(zhì),但可能含有植物或酵母的水解產(chǎn)物。很多B27無血清培養(yǎng)基都不含動物來源成分。
B27無血清培養(yǎng)基的基本配方:
基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細胞在體外培養(yǎng)時,多數(shù)呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當其在B27無血清培養(yǎng)基中生長時,由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長。
B27無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點:
增加確定性。
性能更加一致。
容易進行純化和后期處理。
對細胞功能進行評估。
增強生長和/或產(chǎn)量。
生理反應性的更好對照。
加強細胞內(nèi)介質(zhì)的檢測。
B27無血清培養(yǎng)基使用方法
血清仍是動物細胞培養(yǎng)中基本的的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或者細胞生長狀況不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),待細胞生長旺盛以后,再換成無血清培養(yǎng)液。
細胞轉(zhuǎn)入B27無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個適應過程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無血清培養(yǎng)。在降低過程中要注意觀察細胞形態(tài)是否發(fā)生變化,是否有部分細胞死亡,存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。
在實驗后這些細胞一般不再繼續(xù)保留,很少有細胞能夠長期培養(yǎng)于B27無血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細胞轉(zhuǎn)入B27無血清培養(yǎng)基之前,要留有種子細胞,種子細胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中,以保證細胞的特性不發(fā)生變化。