革蘭氏染色液
簡(jiǎn)要描述:貨 號(hào):FXC0460名 稱:革蘭氏染色液規(guī) 格:10/100ml/500ml價(jià) 格:80/420.00/1200
產(chǎn)品型號(hào): FXC0460
所屬分類:染色液
更新時(shí)間:2024-01-07
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
革蘭氏染色液
組成 | 規(guī)格(10ml) | 規(guī)格(100ml) | 規(guī)格(500ml) |
結(jié)晶紫 | 10ml | 100ml | 500ml |
碘液 | 10ml | 100ml | 500ml |
95%酒精 | 10ml | 100ml | 500ml |
蕃紅 | 10ml | 100ml | 500ml |
保質(zhì)期:2-8度一年.
革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,媒染劑碘液進(jìn)入菌體后與結(jié)晶紫結(jié)合,革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)碘與結(jié)晶紫攝取量多且牢固,不易被酒精脫色。革蘭氏陰性菌對(duì)碘與結(jié)晶紫攝取量少,不牢固,易被酒精脫色。為觀察方便,脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅進(jìn)行復(fù)染。陽(yáng)性菌仍帶紫色,陰性菌則被染上紅色。
革蘭氏染色液操作步驟:
1、標(biāo)本處理:
(1).有菌部位的標(biāo)本,如痰液、糞便、各種拭子、創(chuàng)面等可直接涂片。
(2).無菌部位的標(biāo)本,如腦脊液、胸水、腹水、膽汁、尿液、關(guān)節(jié)液等,應(yīng)取適量標(biāo)本(zui高可達(dá)5-7ml),經(jīng)3000rpm 離心10min.,取沉渣涂片染色。
2、涂片制作:菌液涂片時(shí),用接種環(huán)沾取菌液點(diǎn)在載玻片上,標(biāo)本可直接在玻片上涂布;菌落涂片時(shí),先取生理鹽水一滴,置玻片上,用接種針挑取菌落在鹽水中涂布。制作的涂片應(yīng)自然干燥,并經(jīng)火焰固定,固定的溫度不宜過高,以玻片背面接觸手背不燙為準(zhǔn),否則可能使細(xì)菌形態(tài)改變。將固定后的涂片進(jìn)行染色。
3、染色方法:
革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握酒精脫色程度,如脫色過度,則陽(yáng)性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時(shí),陰性菌可被誤染為陽(yáng)性菌。此外,菌齡也影響染色結(jié)果,如陽(yáng)性菌培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng),或已死亡及部分菌自行溶解了,都可能會(huì)呈陰性反應(yīng)。
(1).加上結(jié)晶紫后,染色1分鐘,水洗。
(2).加上碘液后染色1分鐘,水洗。
(3).加上95%酒精,搖動(dòng)玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約30-60秒,水洗,吸去水分。
(4).加上蕃紅后,染色1分鐘,水洗。
(5).吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。
4.結(jié)果觀察:紫色為革蘭氏陽(yáng)性,紅色為革蘭氏陰性。
注意事項(xiàng):
1.標(biāo)本涂片不能太厚,嚴(yán)格按操作要求進(jìn)行。
2.玻片通過火焰溫度不能太高。
3.若涂片較厚,應(yīng)延長(zhǎng)脫色時(shí)間,直至不再出現(xiàn)紫色為止。
4.碘液變透明,則不能使用。
5.水洗時(shí)動(dòng)作要輕柔,沿載玻片對(duì)角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。
如果用量少,買現(xiàn)成的比較話算,如果用量大,自己配起來也溶液,就是試劑種類多了點(diǎn)。其配制方法如下:
(1)結(jié)晶紫(crystal violet)液:結(jié)晶紫乙醇飽和液(結(jié)晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸銨水溶液80mL 將兩液混勻置24h后過濾即成。
(2)盧戈(Lugol)氏碘液:碘0.33g,碘化鉀0.66g,蒸餾水100mL。先將碘化鉀溶于少量蒸餾水中,然后加入碘使之*溶解,再加蒸餾水至100mL即成。配成后貯于棕色瓶?jī)?nèi)備用,如變?yōu)辄S色即不能使用。
(3)95%乙醇:用于脫色,脫色后可選用以下(4)或(5)的其中一項(xiàng)復(fù)染即可。
(4)番紅溶液:番紅O(safranine,又稱沙黃O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解后可貯存于密閉的棕色瓶中,用時(shí)取20mL與80mL蒸餾水混勻即可。
組成 | 規(guī)格(100ml) | 價(jià)格(500ml) | 規(guī)格(500ml) | 價(jià)格(500ml) |
結(jié)晶紫染色液 | 100ml | 160 | 500ml | 480 |
革蘭氏碘液 | 100ml | 140 | 500ml | 360 |
酒精脫色液 | 100ml | 20 | 500ml | 60 |
沙黃染色液 | 100ml | 160 | 500ml | 480 |