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invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶iii主要特點

發(fā)布時間: 2016-06-20  點擊次數(shù): 2328次
多invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶iii都具有多種酶活性,主要包括以下幾種活性。  
①DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反轉(zhuǎn)錄酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的DNA出錯率比較高。
 
②RNaseH活性;由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子,將由RNaseH從RNA5′端水解掉RNA分子。
 
③DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性;以反轉(zhuǎn)錄合成的*條DNA單鏈為模板,以dNTP為底物,再合成第二條DNA分子。
除此之外,有些反轉(zhuǎn)錄酶還有DNA內(nèi)切酶活性,這可能與病毒基因整合到宿主細(xì)胞染色體DNA中有關(guān)。反轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)對于遺傳工程技術(shù)起了很大的推動作用,目它已成為一種重要的工具酶。用組織細(xì)胞提取mRNA并以它為模板,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,合成出互補的DNA(cDNA),由此可構(gòu)建出cDNA文庫(cDNalibrary),從中篩選特異的目的基因,這是在基因工程技術(shù)中zui常用的獲得目的基因的方法,詳見基因工程一章。
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