美國光譜醫(yī)學(xué)透析袋濃縮樣品的方法:
大多數(shù)情況下,純化的樣品會被稀釋。如果下游需要的樣品濃度比較高時,可能需要對樣品進(jìn)行濃縮。本身濃縮的方法如下。
1)吹干濃縮法:將蛋白溶液裝入透析袋內(nèi),放在電風(fēng)扇下吹。此法簡單,但速度慢,且溫度不能過高,不要超過15℃。
2)透析袋濃縮法:利用濃縮蛋白質(zhì)溶液是應(yīng)用較廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋(無透析袋可用玻璃紙代替),結(jié)扎,把高分子聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑配成30%-40%濃度的溶液,將裝有蛋白液的透析袋放入即可。吸水劑用過后,可放入溫箱中烘干或自然干燥后,仍可再用。
主要用于更換蛋白質(zhì)的緩沖液,得有透析袋。不需要特殊的儀器。一般用得是PEG20000進(jìn)行實驗,簡單,快速,對蛋白沒什么影響。
美國光譜醫(yī)學(xué)透析袋的使用前處理:(試驗要求不高的可以使用簡易處理方法:在沸水中煮沸10分鐘左右即可使用)
1.把透析袋剪成適當(dāng)長度的小段。
2.在大體積的2%碳酸氫鈉和EDTA中將透析袋煮沸10分鐘。
3.用蒸餾水*清洗透析袋。
4.放在EDTA中將之煮沸10分鐘。
5.冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋是必須戴手套。
6.用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干凈。