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如何做出一張合格的組織切片?
一般要先取材→固定→透明→包埋→切片,最后進行染色組化等操作。本文著重敘述取材以后如何進行包埋和切片。
包埋可分為OCT包埋(冰凍切片)與石蠟包埋。
冰凍切片對于組織的抗原性保留比較好,但是形態(tài)保留比較差,一般用來做原位雜交ISH,免疫熒光IF。冰凍切片較厚一般厚度8~15μm。冰凍包埋步驟較為簡潔,固定之后,直接用鑷子將樣品放置到樣品托上,擠壓OCT*包裹組織,放入冷凍機待OCT凝固即可。凝固后就可以直接切片。如果不能及時切片,用錫箔紙包裝好,放入-80℃存放。
石蠟切片,一般用來做HE染色或者免疫組織化學IHC。厚度更薄,一般為4um,工藝較為復雜并且制作樣本的好壞取決于不同組織的種類和組成,更加依賴制作者的經(jīng)驗,需要在實驗過程中不斷優(yōu)化才能得到最佳的實驗條件。
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