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ECC顯色培養(yǎng)基說明書
ECC顯色培養(yǎng)基說明書
組 分
瓊脂:15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉:8.0 g/L 氯化鈉:5.0 g/L
色素:4.8 g/L
pH值 7.2
操作
1、取瓶?jī)?nèi)干粉32.8g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中,充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照32.8 g/L的比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過100℃,切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀?,直?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。
3、加熱后的培養(yǎng)基冷卻至48℃,輕輕地?fù)u動(dòng)均勻,傾注平皿,使其凝固,晾干備用。
保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存2周(2℃8℃,避光)。
接種
傾注培養(yǎng)法接種:接種1mL樣品于直徑為90mm的培養(yǎng)皿中,然后傾注10mL上述冷卻至48℃的培養(yǎng)基,混勻使其凝固,36±1℃倒置培養(yǎng)24小時(shí)。
表面接種法:劃線或涂布接種(冰箱內(nèi)保存的平板使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫),在36
如果接種樣品為糞大腸菌群,培養(yǎng)溫度應(yīng)設(shè)置為44℃。如果采用MPN法總檢測(cè)大腸菌群,培養(yǎng)溫度應(yīng)設(shè)置為30℃。
結(jié)果
微生物(Microorganism) | 菌落顏色 |
大腸桿菌(E.coli) | 藍(lán)色 |
其他大腸桿菌(含糞大腸菌群)(Other coliform bacteria) | 紅色(淡紫色,紫紅色) |
其他革蘭氏陰性菌 | 無色 |
性能及局限
對(duì)大腸桿菌靈敏度為97%(Ogden et al. 1991)。葡萄糖醛酸酶陰性大腸桿菌(如:大腸桿菌O157)可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果,如果主要研究病原菌如大腸桿菌O157,可選用科瑪嘉大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基。若主要研究總大腸菌群,哈夫尼菌屬出現(xiàn)假陰性結(jié)果,為無色菌落。
貯存條件
干粉需保存于15℃30℃干燥環(huán)境中,在有效期前使用。
污染處理
使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。
附:供體外診斷使用,產(chǎn)品須專業(yè)人員操作。
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