Sigma蛋白酶K是怎樣應(yīng)用在分子生物學(xué)中的

 

　　Sigma蛋白酶K是怎樣應(yīng)用在分子生物學(xué)中的

　　線粒體分離

　　核酸純化產(chǎn)物的蛋白質(zhì)消解。在分子生物學(xué)應(yīng)用中，蛋白酶K常用于消解無(wú)用的蛋白質(zhì)，例如從微生物、培養(yǎng)細(xì)胞和植物的DNA或RNA制劑中消解核酸酶。在核酸制劑之中，這種酶的使用濃度通常為50-200µg/ml，pH7.5-8.0，37°C。孵育時(shí)間30分鐘至18小時(shí)不等。盡管在長(zhǎng)期孵育時(shí)，蛋白酶K可以自動(dòng)消解，但通常還是通過(guò)后續(xù)的本分萃取法使其變性。

　　蛋白酶K已經(jīng)用于去除陽(yáng)離子蛋白質(zhì)上結(jié)合的內(nèi)毒素，如溶菌酶和核糖核酸酶A上的內(nèi)毒素。

 

　　確定酶在膜上的分布

　　處理石蠟包埋的組織，以便暴露抗原結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行抗體標(biāo)記。

 

　　去除核酸酶進(jìn)行原位雜交

　　傳染性海綿狀腦病(TSE)朊病毒研究及草擬的診斷測(cè)試方法利用蛋白酶K消解來(lái)自大腦組織樣本的蛋白質(zhì)。

　　采用蛋白酶K消解法進(jìn)行蛋白酶足跡實(shí)驗(yàn)，去除蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)表面互作。