Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III采用大腸桿菌表達體系,是經(jīng)過高度純化的重組酶。該酶的RNA酶H活性很低,具有更高的熱穩(wěn)定性,廣泛應用于鏈cDNA 的合成,反轉(zhuǎn)錄溫度高達55°C,特異性和cDNA產(chǎn)量明顯提高。
Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III都具有多種酶活性,主要包括以下幾種活性:
1、DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為色氨酸的tRNA,在引物末端以方向合成DNA。反轉(zhuǎn)錄酶中不具有外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的DNA出錯率比較高。
2、RNase H活性;由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子,將由RNase H從RNA5端水解掉RNA分子。
3、DNA指導的DNA聚合酶活性;以反轉(zhuǎn)錄合成的條DNA單鏈為模板,以dNTP為底物,再合成第二條DNA分子。
除此之外,有些反轉(zhuǎn)錄酶還有DNA內(nèi)切酶活性,這可能與病毒基因整合到宿主細胞染色體DNA中有關。
Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III注意事項:
對于GC含量比較高的RNA的反轉(zhuǎn)錄,試劑盒的使用說明中給予了特別說明,請予以關注。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
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