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細(xì)胞培養(yǎng)中常用溶液配制

發(fā)布時(shí)間: 2017-02-09  點(diǎn)擊次數(shù): 2955次

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PBS

NaCl 8 g
KCl 0.2 g
KH2PO4 0.2 g 
Na2HPO4·12H2O 3.634g
加dH2O至900ml,調(diào)pH至7.4,補(bǔ)水至1L,分裝到5個(gè)藍(lán)蓋瓶,滅菌。

TP+EDTA混合液

稱取TP 0.25g,EDTA 0.02g,溶于200ml PBS中,過(guò)濾除菌。

DMEM與RPMI 1640
前者稱取NaHCO3 3.7g,后者稱取2.0g。
調(diào)pH至7.2~7.4。

谷氨酰胺的配制
稱取Gln 2.922g,溶于三蒸水,加至100ml,即配成200 mM的儲(chǔ)液。充分?jǐn)嚢枞芙猓^(guò)濾除菌,分裝到2ml EP管中,-20℃保存。使用時(shí)可向100ml培養(yǎng)液中加入1ml Gln儲(chǔ)液。
由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,4℃下放置1周可分解50%,加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲(chǔ)存2周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來(lái)的谷氨酰胺。

G418儲(chǔ)液(0.1 mg / uL)
100ml 培養(yǎng)基中加入儲(chǔ)液400uL,則篩選濃度為400 ug/ml。
100ml培養(yǎng)基中加入儲(chǔ)液200 uL,則維持濃度為200 ug/ml。

 

LB液體培養(yǎng)基
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g 
NaCl 10g
dH2O 1L
用5M的NaOH約0.2 ml調(diào)pH至7.0。滅菌20min。
LB固體培養(yǎng)基,另加瓊脂12~15g。 
LB中氨芐的添加
稱取5g氨芐,加水定容至50ml,充分溶解,得到的儲(chǔ)液濃度為100mg/ml。過(guò)濾除菌,分裝到EP管中,-20℃保存。
欲使其工作濃度為100ug/ml,則需稀釋1000倍。
即加1ml到1000ml培養(yǎng)基中。或加100ul到100ml培養(yǎng)基中。

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