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膜再生液又稱為Western抗體洗脫液,常用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。適用于Western化學(xué)發(fā)光檢測后的蛋白膜的重復(fù)利用,尤其適用于PVDF膜,其次為硝酸纖維素膜。那么膜再生液的作用具體有哪些呢?
膜再生液的作用:
使用stripping buffer 可以去除一抗和二抗,然后可以重新利用膜。使用膜再生液可以對同一張膜進(jìn)行多次WESTERNBLOT檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液10-60分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪WESTERNBLOT實驗。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強(qiáng)。適用于清除硝酸纖維素膜或PVDF膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。
以上就是膜再生液的作用,但是由于重復(fù)使用,蛋白信號會有一定減弱,可以適當(dāng)多用幾次。